П-НИТРОФЕНИЛОВЫЙ ЭФИР D-БИОТИНА

Описание

п-Нитрофениловый эфир D-биотина (D-Biotin p-nitrophenyl ester, биотинил-4-нитрофениловый эфир) — активированное производное витамина D-биотина (витамина В7, витамина Н), в котором карбоксильная группа биотина этерифицирована 4-нитрофенолом. Такие n-нитрофениловые эфиры карбоновых кислот относятся к активированным сложным эфирам: n-нитрофенолят — хорошая уходящая группа, поэтому эфир легко вступает в реакцию ацилирования с первичными аминами (в том числе с ε-аминогруппой лизина белков) при мягких условиях, без дополнительных конденсирующих реагентов. Реагент применяется в биохимии и молекулярной биологии для биотинилирования — ковалентного присоединения биотиновой метки к белкам, антителам, олигонуклеотидам и другим биомолекулам, что позволяет затем детектировать или очищать меченые молекулы через высокоаффинное взаимодействие биотин-стрептавидин (авидин).

Основные атрибуты

• CAS №: 33755-53-2
• Химическая формула: C16H19N3O5S
• Синонимы: PBNP, 4-нитрофенил (+)-биотинат, (+)-4-нитрофениловый эфир биотина, BNP, D-п-нитрофениловый эфир биотина
• Молекулярный вес: 365,4; точная масса: 365,104553
• Номер ЕС: 1533716-785-6
• Идентификатор DSSTox: DTXSID80187424
• Код ТН ВЭД (HS code): 29349990
• PSA: 139; XLogP3: 2

Физико-химические характеристики

• Плотность: 1,3 ± 0,1 г/см3
• Температура плавления: 163-165 °C (по литературным данным)
• Температура кипения: 642,9 °C при 760 мм рт. ст.
• Температура вспышки: 342,6 ± 30,1 °C
• Показатель преломления: 1,584
• Растворимость: в метаноле растворим до 25 мг/мл, раствор прозрачный, от бесцветного до зеленовато-жёлтого цвета
• Условия хранения: -20 °C

Область применения

Реагент для биотинилирования аминосодержащих биомолекул в лабораторной практике: белков, антител, пептидов, олигонуклеотидов. После присоединения биотиновой метки меченую молекулу можно детектировать конъюгатами стрептавидина с ферментами (пероксидаза хрена, щелочная фосфатаза) или флуорофорами, а также выделять аффинной хроматографией на стрептавидиновых/авидиновых носителях. Использование активированного п-нитрофенилового эфира вместо свободной биотиновой кислоты позволяет проводить реакцию мечения в мягких водных или водно-органических условиях без карбодиимидных активаторов.

Информация по технике безопасности

• WGK Германия: 3
• Инструкции по технике безопасности: 22-24/25

Хранение

Хранить при -20 °C, в защищённой от влаги и света герметичной таре — активированный эфир гидролитически нестабилен и постепенно теряет реакционную способность при комнатной температуре и в присутствии влаги.

Дополнительно: биотин-стрептавидиновая система

D-биотин — бициклическое соединение из имидазолидинонового (уреидного) и тетрагидротиофенового колец с валериановой боковой цепью, оканчивающейся карбоксильной группой, которая в данном производном этерифицирована 4-нитрофенолом. Свободный биотин образует одно из наиболее прочных известных нековалентных взаимодействий с белком стрептавидином (и авидином) — эта пара специфично и с высокой аффинностью связывается даже после ковалентного присоединения биотиновой метки к другой молекуле, что и лежит в основе широкого применения биотинилирующих реагентов в детекции, аффинной очистке и иммуноанализе.